产品货号：
KD2314
中文名称：
0.5%伊文斯蓝染色液
英文名称：
0.5% Evans Blue stain solution
产品规格：
100mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
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保存：常温保存，避光，保质期2年。
产品说明：
伊文斯蓝(Evans Blue)又称偶氮蓝，分子式C34H24N6Na4O14S4，分子量为960.80，CAS号为314-13-6。
伊文斯蓝与台盼蓝都是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性和细胞是否存活。活细胞因有外排功能而无法被伊文斯兰染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。因此可以通过此方法在显微镜下区分死细胞与活细胞，但无法区分死亡与坏死。
使用说明：
(一)血脑屏障通透性
1、取处理后的实验动物(以小鼠为例)，静脉注射伊文斯蓝染色液，小鼠眼睛、皮肤出现蓝色。0.5～1h后处死小鼠，取目的脑组织。
2、脑组织置于1.5mL离心管中，加入1mL PBS，迅速用组织匀浆器将脑组织制成匀浆，离心。
3、取上清，加入等量三氯乙酸，4℃孵育。该步骤亦可采用如下操作:取上清，按上清:丙酮=3:7比例加入丙酮，室温孵育24h。
4、离心15min。
5、取上述溶液，用分光光度计测620nm处吸光值(OD值)。同时测定已知不同梯度的标准伊文斯蓝的OD值，绘制标准曲线。根据标准曲线计算出待测样品的伊文斯蓝含量。
(二)活细胞染色
1、取100μL重悬细胞到离心管内，加入100μL伊文斯蓝染色液轻轻混匀染色(染色时间可适当延长，但不宜超过10min)。
2、吸取少量经过染色后的细胞，用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量，每个细胞样品至少数500个细胞，数出蓝色细胞和细胞总数。
细胞存活率计算公式如下：细胞存活率＝(细胞总数－蓝色细胞数)/细胞总数×100%
注意事项：
1、Evans Blue Stain对人体有轻微毒性，请小心防护。
2、细胞染色时，注意凋亡小体偶尔也有拒染现象。
3、血脑屏障通透性实验中，Evans Blue Stain注射量应根据不同动物以及动物的重量调整。
4、最好采用低温冷冻离心机进行离心。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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